【产品名称】
通用名称:红细胞基因分子分型试剂盒(NGS法)
英文名称:RBC NGS Typing Kits
【产品用途】
本试剂盒用于对人类红细胞抗原(Red Blood cell Antigen,RBCA)编码基因位点快速的进行高分辨率基因分型。
【检验原理】
本试剂盒采用Next Generation Sequencing(NGS)测序方法对RBCA基因进行分型,针对RBCA位点特异性制备扩增混合液,与Q5 Taq聚合酶和样本基因组DNA进行各个位点特异性的DNA扩增。对扩增产物进行等比混合,酶法打断,用磁珠纯化后,3’和5’端分别加上接头,这些接头会使DNA片段随机结合到附着于玻璃表面(Flow cell),并且在固相的表面经过桥式扩增。这样就形成了数千份相同的单分子簇,被用做测序模板。测序采取边合成边测序的方法,和模板配对的ddNTP原料被添加上去,不配对的ddNTP原料被洗去,成像系统能够捕捉荧光标记的核苷酸。随着DNA 3' 端的阻断剂的去除,下一轮的延伸就可以进行。测序结果在计算机软件辅助下完成RBCA等位基因分型。
1900年Landsteiner发现了A、B、O血型;1902年,Landsteniner的两名学生又发现了较为稀少的AB型血;1927年国际上采纳了Landstenier原定的字母命名,ABO血型系统正式成立,确定血型有A、B、O、AB四种类型;1940年Landsteiner等,发现恒河猴(Rhesus Macacus)和多数人体内的红细胞上存在Rh血型的抗原物质,故而命名。
【ABO血型系统抗原的产生】
存在于红细胞膜上,白细胞、血小板和其他组织细胞上也有分布;
胎儿在5-6周可检测出ABH抗原,18个月发育完全;20岁左右到高峰,老年的抗原性下降;血型抗原一般终生不变。
【ABO血型系统抗原遗传】
位于第九号染色体长臂(9q34)
三个等位基因:A、B、O;其中A、B是显性基因,O是隐形基因;父母双方个遗传给子代一个基因,可以组成六种基因型,四种表现型。
【ABO血型系统亚型】
是指属于同一血型抗原,但抗原结构和性能或抗原位点数有一定差异的引起的变化
主要有:A1、A2、A1B、A2B
ABO血型系统亚型
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【检验方法】
1. 一般安全说明
1.1 只用于体外诊断。
1.2 必须由受过良好训练和授权的人员来操作。
1.3 所有试剂和样品应被视作潜在污染源,应采取适当的预防措施。
1.4 在PCR前与PCR后应是在不同的实验空间内进行,并且使用不同的加样器,不可混用。
1.5 胶染色的溴化乙啶是潜在的致癌物,不能与皮肤直接接触。实验时要佩戴保护手套。
1.6 在进行紫外凝胶成像时眼睛不可直视紫外灯源,应佩戴防紫外眼睛。
1.7 注意试剂的有效期,不要使用过期试剂。
1.8 不要使用混浊或者可能被微生物污染的试剂。
1.9 用过的PCR微孔板应当被视为潜在的污染源,和溴化乙啶染色过的琼脂糖凝胶一样须按照国家有关规定进行销毁。
1.10 实验试剂及耗材安全数据表可从北京诺诗康瀛基因技术股份有限公司申请得到。

【注意事项】